本試劑盒基于熒光定量分析技術，用于馬源性成分快速鑒定檢測分析，具有高效、快速、準確的特點，可進行批量樣本快速檢測。用于檢測固體或液體類食品等樣品中有無馬源性特定成份,是政府檢測機構、食品加工企業、進出口貿易標準的檢測方法，與國家檢測標準、歐盟檢測標準相一致。 檢測結果僅供參考。

TMB底物液
底物顯色液
ELISA 顯色液

用于HRP標記的ELISA；單一組分，穩定，使用方便，靈敏度高。主要成分是3,3’,5,5’–四甲基聯苯胺[3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine(TMB)],是辣根過氧化物酶（HRP）的底物，在辣根過氧化物酶的作用下，發生氧化劑反應生成藍色產物。顏色的強弱與HRP的活性呈正比，從而可以用于基于HRP標記物的檢測。

根據使用的數量，將該次需要的TMB顯色液從大瓶轉移的干凈的避光小瓶中，后續從小瓶中取用:

1) 加液：加完HRP結合物并溫育一定時間后，洗板3-5次，每孔加TMB顯色液100μL - 200μL。  

2) 根據個人實驗需要，在室溫（15-25℃）或37°C下溫育10-30分鐘。

3) 終止：加50微升的2M鹽酸或硫酸溶液終止反應，孔中反應液由藍色變為黃色。

4) 讀數：終止反應后30分鐘內在450nm處讀數。

如果出現高的反應背景或沉淀，表明TMB底物反應過于強烈。為了避免產生沉淀，可在終止后馬上

讀數；或者進一步稀釋一抗和/或HRP結合物

根據不同濃度的標準品平行樣檢測得到的OD值錄入到Tetrodotoxin ELISA軟件中對應濃度的表格中，即可獲得如圖1所示標準曲線。根據檢測樣品編號把樣品提取液檢測得到的OD值錄到TTX         ELISA軟件的下方對應的表格中，即可獲得樣品提取液中河豚毒素的濃度C（ng/mL）。